家蠶核型多角體病毒(BmNPV)是蠶業(yè)中的重要病原體,因其對(duì)家蠶健康的嚴(yán)重影響導(dǎo)致巨大的經(jīng)濟(jì)損失。研究表明,該病毒通過調(diào)控宿主氨基酸代謝支持其復(fù)制,其中精氨酸是病毒增殖的關(guān)鍵氨基酸。BmNPV通過上調(diào)氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體Slc7a6增強(qiáng)精氨酸攝取,并誘導(dǎo)線粒體自噬以維持細(xì)胞內(nèi)氨基酸水平,從而促進(jìn)病毒復(fù)制。
相關(guān)研究發(fā)表于PLOS Pathogens,2025年7月8日,DOI: 10.1371/journal.ppat.1013331。
研究團(tuán)隊(duì)旨在探索BmNPV如何在家蠶細(xì)胞中重編程氨基酸代謝,具體需求包括:驗(yàn)證Slc7a6在精氨酸攝取及BmNPV復(fù)制中的作用;評(píng)估自噬在氨基酸穩(wěn)態(tài)中的貢獻(xiàn);以及在家蠶和BmN細(xì)胞模型中研究精氨酸代謝對(duì)病毒增殖的影響。需要高特異性的ATG8抗體用于檢測自噬標(biāo)志物,確保免疫熒光和Western Blot實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。
ATG8抗體的制備需確保高特異性和穩(wěn)定性,以準(zhǔn)確檢測BmNPV感染誘導(dǎo)的自噬標(biāo)志物;抗體需兼容多種實(shí)驗(yàn)平臺(tái)(如IF、WB),并避免非特異性信號(hào);此外,敲除Slc7a6并評(píng)估其對(duì)病毒復(fù)制的影響需要高效的基因編輯技術(shù)和可靠的檢測方法。
- 抗體開發(fā)策略:AtaGenix采用新西蘭兔免疫制備ATG8多克隆抗體,優(yōu)化免疫原序列以提高特異性,通過Protein A/G親和純化,確??贵w純度>90%。
- 實(shí)驗(yàn)流程:通過優(yōu)化的免疫方案和親和純化流程,制備高特異性ATG8抗體,ELISA效價(jià)>1:64000,適配免疫熒光(IF)和Western Blot(WB)實(shí)驗(yàn)。
- 驗(yàn)證手段:通過激光共聚焦顯微鏡和Fiji軟件分析BmNPV感染誘導(dǎo)的線粒體自噬,驗(yàn)證ATG8抗體在檢測自噬標(biāo)志物中的特異性;結(jié)合qPCR和TCID50檢測,確認(rèn)BmNPV病毒基因(vp39)表達(dá)和病毒滴度的變化。
- 附加支持:AtaGenix提供詳細(xì)的抗體質(zhì)控報(bào)告(包括SDS-PAGE、ELISA效價(jià)和批次一致性數(shù)據(jù)),推薦抗體應(yīng)用場景(如IF染色條件、WB稀釋比例)。
AtaGenix提供的高特異性ATG8多克隆抗體在家蠶BmNPV感染研究中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。研究通過抗體驗(yàn)證了BmNPV誘導(dǎo)的線粒體自噬,證實(shí)病毒通過自噬維持氨基酸穩(wěn)態(tài)以支持復(fù)制??贵w的高特異性和穩(wěn)定性確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性,助力團(tuán)隊(duì)揭示BmNPV通過“外源攝取-內(nèi)源供應(yīng)”模型調(diào)控精氨酸代謝的機(jī)制,為開發(fā)針對(duì)BmNPV的抗病毒策略提供了新視角,具有重要的農(nóng)業(yè)應(yīng)用潛力。
BmNPV感染誘導(dǎo)的線粒體自噬
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