研究團(tuán)隊(duì)需要高特異性抗體來(lái)檢測(cè)USP8蛋白在Ser718位點(diǎn)的磷酸化狀態(tài),以揭示其在病毒感染誘導(dǎo)下的活性變化。此抗體必須能用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)(Western Blot)檢測(cè)天然和過(guò)表達(dá)條件下的磷酸化變化。
1. 抗體特異性:確保抗體能夠特異性識(shí)別USP8在Ser718位點(diǎn)的磷酸化形式,而不交叉識(shí)別非磷酸化形式。
2. 應(yīng)用兼容性:抗體需適用于Western blot條件下,能清晰區(qū)分不同處理組間USP8活性變化。
3. 質(zhì)量穩(wěn)定性:抗體必須具備批次一致性,以支持不同實(shí)驗(yàn)階段的數(shù)據(jù)連續(xù)性。
1. 抗體定制:
- AtaGenix通過(guò)免疫新西蘭兔,使用人USP8蛋白Ser718位點(diǎn)的磷酸化肽段(Cys-REPSKLKRSYS(p)SPDI)成功制備高特異性抗體。
- 采用親和純化方法,確保獲得針對(duì)磷酸化位點(diǎn)具有高度特異性的多克隆抗體。
2. 實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證與支持:
- 抗體在HEK293T、THP1等細(xì)胞中進(jìn)行磷酸化檢測(cè)驗(yàn)證,成功用于Co-IP和Western blot實(shí)驗(yàn)。
- AtaGenix提供完整的免疫原序列、實(shí)驗(yàn)建議及背景信息,支持下游機(jī)制研究與論文發(fā)表。
本次定制抗體的成功應(yīng)用,幫助研究團(tuán)隊(duì)揭示了AKT通過(guò)Ser718位點(diǎn)磷酸化USP8,并調(diào)節(jié)MDA5穩(wěn)定性的分子機(jī)制,拓展了MDA5相關(guān)自身免疫疾病的潛在治療策略。相關(guān)結(jié)果發(fā)表于《Advanced Science》,并為今后精準(zhǔn)治療MDA5相關(guān)疾病奠定基礎(chǔ)。
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