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AtaGenix定制USP8磷酸化抗體助力MDA5穩(wěn)態(tài)機(jī)制研究,揭示自身免疫治療新靶點(diǎn)

發(fā)表時(shí)間:2025-07-14 訪問(wèn)次數(shù):53
一、研究背景
黑色素分化相關(guān)蛋白5(MDA5)是關(guān)鍵的細(xì)胞內(nèi)RNA感受器,能夠介導(dǎo)I型干擾素(IFN-I)產(chǎn)生,并誘導(dǎo)抗病毒先天免疫反應(yīng)。然而,MDA5的功能獲得性突變或持續(xù)激活可導(dǎo)致多種自身免疫性疾病,如Aicardi-Goutières綜合征(AGS)和皮肌炎(DM)。2025年,四川醫(yī)學(xué)科學(xué)院與四川省人民醫(yī)院聯(lián)合在《Advanced Science》期刊發(fā)表研究(DOI: 10.1002/advs.202503865),系統(tǒng)闡明了去泛素化酶USP8通過(guò)穩(wěn)定MDA5調(diào)控其穩(wěn)態(tài),并揭示了USP8與AKT磷酸化通路共同促進(jìn)MDA5活性調(diào)節(jié)的新機(jī)制。
圖1:USP8–MDA5通路與AKT調(diào)控概覽示意圖
圖1.USP8穩(wěn)定MDA5并受AKT通路磷酸化調(diào)控的總體示意。
二、客戶需求

研究團(tuán)隊(duì)需要高特異性抗體來(lái)檢測(cè)USP8蛋白在Ser718位點(diǎn)的磷酸化狀態(tài),以揭示其在病毒感染誘導(dǎo)下的活性變化。此抗體必須能用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)(Western Blot)檢測(cè)天然和過(guò)表達(dá)條件下的磷酸化變化。

三、技術(shù)挑戰(zhàn)

1. 抗體特異性:確保抗體能夠特異性識(shí)別USP8在Ser718位點(diǎn)的磷酸化形式,而不交叉識(shí)別非磷酸化形式。
2. 應(yīng)用兼容性:抗體需適用于Western blot條件下,能清晰區(qū)分不同處理組間USP8活性變化。
3. 質(zhì)量穩(wěn)定性:抗體必須具備批次一致性,以支持不同實(shí)驗(yàn)階段的數(shù)據(jù)連續(xù)性。

四、定制抗體解決方案

1. 抗體定制:
- AtaGenix通過(guò)免疫新西蘭兔,使用人USP8蛋白Ser718位點(diǎn)的磷酸化肽段(Cys-REPSKLKRSYS(p)SPDI)成功制備高特異性抗體。
- 采用親和純化方法,確保獲得針對(duì)磷酸化位點(diǎn)具有高度特異性的多克隆抗體。

2. 實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證與支持:
- 抗體在HEK293T、THP1等細(xì)胞中進(jìn)行磷酸化檢測(cè)驗(yàn)證,成功用于Co-IP和Western blot實(shí)驗(yàn)。
- AtaGenix提供完整的免疫原序列、實(shí)驗(yàn)建議及背景信息,支持下游機(jī)制研究與論文發(fā)表。

圖2:USP8 Ser718位點(diǎn)抗體在細(xì)胞中的磷酸化檢測(cè)示例(WB/Co-IP) 圖3:USP8 Ser718免疫原相關(guān)信息與應(yīng)用示意
圖2–3.定制抗體在HEK293T/THP1等體系中應(yīng)用示例與免疫原相關(guān)信息。
五、研究成果與影響

本次定制抗體的成功應(yīng)用,幫助研究團(tuán)隊(duì)揭示了AKT通過(guò)Ser718位點(diǎn)磷酸化USP8,并調(diào)節(jié)MDA5穩(wěn)定性的分子機(jī)制,拓展了MDA5相關(guān)自身免疫疾病的潛在治療策略。相關(guān)結(jié)果發(fā)表于《Advanced Science》,并為今后精準(zhǔn)治療MDA5相關(guān)疾病奠定基礎(chǔ)。

關(guān)于我們

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