在進行重組蛋白制備的過程中，我們常常會遇到各種各樣的問題，因為原料不同、制備環(huán)境不同、技術操作不同以及一些不規(guī)范的小錯誤，使得我們所要面對的問題各不相同。當然了，隨著技術的不斷完善，一些問題得到了良好的解決。但是，因為一些操作，使得很多問題依然存在。今天，普健生物在這里和大家具體聊聊有關重組蛋白純化過程中出現的沉淀現象的原因及避免方法。

　　1、鎳離子含量過高。在Ni純化過程中，一部分鎳離子會脫落，因為其屬于重金屬，會和蛋白凝集并產生沉淀;

　　2、我們搭建的環(huán)境不適合蛋白制備，需要重新考慮溶液濃度、PH值、溫度等方面的因素;

　　3、溶液PH值接近蛋白等電點(一般PH值接近等電點時，都容易造成蛋白沉淀);

　　4、使用反復凍融的蛋白。我們知道，每次凍融都會在一定概率上造成蛋白活性的丟失，反復凍融則會造成這個概率增加;

　　5、長時間4度保存。長時間將蛋白保持在4度環(huán)境下，容易滋生細菌，從而造成蛋白降解和沉淀;

　　如何避免這些問題呢?

　　1、當我們用鎳柱來純化蛋白時，適當加入一些EDTA，從而減少重金屬反應;

　　2、重新分析蛋白的最佳制備環(huán)境，并保持好相應的制備環(huán)境;

　　3、加入一些輔助性蛋白來保護我們所制備的蛋白產品;

　　4、盡量減少蛋白的反復凍融，盡量制備出來后就使用掉;

　　5、短時間保存可考慮4度環(huán)境，長期保存還是盡量選擇-20度或-80度;

　　其實大家不難發(fā)現，在我們進行重組蛋白制備的時候，很多造成沉淀的情況都是一些小問題所導致，只有將這些細節(jié)方面的工作做好了，蛋白純化工作才能更好地進行。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供優(yōu)質的重組蛋白制備服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。

　　本文網址：http://www.wins-turfy.com/archive/611.html，如需轉載，請標明出處!