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如何進(jìn)行蛋白的定性定量分析?

發(fā)表時(shí)間:2023-01-31 訪問次數(shù):581

  在蛋白和抗體完成之后,我們都需要對(duì)蛋白進(jìn)行相關(guān)性質(zhì)檢測(cè),通過測(cè)量其相關(guān)數(shù)據(jù),來確定蛋白是否適合之后的實(shí)驗(yàn)。通常情況下,我們會(huì)通過質(zhì)譜來進(jìn)行蛋白的定性和定量分析。今天,普健生物就和大家具體聊聊有關(guān)蛋白分析的方式。

  蛋白定性分析:主要用于確定樣品中是否有蛋白的存在,同時(shí)確定是何種蛋白。

  蛋白定性分析通常會(huì)利用質(zhì)譜法來進(jìn)行鑒定和分析,一般采用top-down和bottom-up兩種策略來進(jìn)行,其中bottom-up分析策略的使用更為廣泛。

  其實(shí)從單詞中我們不難發(fā)現(xiàn),一種是自上而下,另外一種是自下而上的分析方式,自下而上的分析方式的原理是通過分析蛋白酶解所產(chǎn)生的肽段來進(jìn)行分析和鑒定;自上而下的分析方式則是直接鑒定完整的蛋白質(zhì),在修飾后翻譯和蛋白同位素異構(gòu)體鑒定方面更具優(yōu)勢(shì),但是蛋白的分離、電離及破碎相對(duì)困難。

  蛋白定量分析:主要用于確定其中蛋白的總含量,或者用于確定其中某種蛋白的含量。

  蛋白定量分析主要分為兩種:相對(duì)定量分析和絕對(duì)定量分析。相對(duì)定量分析是通過測(cè)定目的蛋白中的兩個(gè)或多個(gè)樣本中的表達(dá)量的相對(duì)比例,而非其中每個(gè)樣本的表達(dá)量;而絕對(duì)定量分析則主要研究靶向蛋白組學(xué),通過目標(biāo)到安白的定性和定量分析,驗(yàn)證大規(guī)模蛋白組學(xué)的結(jié)果。

  通過如上的方式,我們就可以分析出所得溶液中蛋白抗體的含量及其特性,之后再通過相應(yīng)的處理方式,獲得純度較高或者比例能夠達(dá)到我們使用需求的蛋白產(chǎn)品。作為一家專業(yè)的蛋白抗體制備公司,普健生物為您提供各類蛋白抗體制備定制服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。